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Results from the “Technical Workshop on Genotoxicity Biosensing” on the micro-scale fluorometric assay of deoxyribonucleic acid unwinding

Baumstark-Khan, Christa und Horneck, Gerda (2007) Results from the “Technical Workshop on Genotoxicity Biosensing” on the micro-scale fluorometric assay of deoxyribonucleic acid unwinding. Analytica Chimica Acta, 593, Seiten 75-81. Elsevier.

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Kurzfassung

The fluorometric analysis of DNA unwinding (FADU assay) was originally designed for rapid detection of X-ray-induced DNA damage in mammalian cells. This cellular bioassay is based on time-dependent alkaline denaturation of DNA under moderate denaturing conditions (pH 12.2–12.4) starting from ends as well as from all DNA break points (single-strand breaks, SSB; double-strand breaks, DSB; alkali-labile sites, ALS). DNA which remained double-stranded after 30 min of alkaline treatment was detected after neutralisation and immediate fragmentation followed by binding to the Hoechst 33258 dye (bisbenzimide) and fluorescence measures. In the current paper, a modified method was used which allows cell cultivation and chemical treatment in the same microplate (μ-FADU) followed by analysis of 96 samples in a microplate fluorescence reader. Exposure of mammalian cells to chemicals was performed for 60 min on ice thus allowing identification of direct acting substances capable of inducing DNA-strand breaks. As an inter-assay standard the action of hydrogen peroxide was tested in every test plate. The results demonstrate that the μ-FADU assay is suitable to detect the presence of chemically induced strand breaks within 3 h.

elib-URL des Eintrags:https://elib.dlr.de/51563/
Dokumentart:Zeitschriftenbeitrag
Titel:Results from the “Technical Workshop on Genotoxicity Biosensing” on the micro-scale fluorometric assay of deoxyribonucleic acid unwinding
Autoren:
AutorenInstitution oder E-Mail-AdresseAutoren-ORCID-iDORCID Put Code
Baumstark-Khan, ChristaNICHT SPEZIFIZIERTNICHT SPEZIFIZIERTNICHT SPEZIFIZIERT
Horneck, GerdaNICHT SPEZIFIZIERTNICHT SPEZIFIZIERTNICHT SPEZIFIZIERT
Datum:2007
Erschienen in:Analytica Chimica Acta
Referierte Publikation:Ja
Open Access:Nein
Gold Open Access:Nein
In SCOPUS:Nein
In ISI Web of Science:Ja
Band:593
Seitenbereich:Seiten 75-81
Verlag:Elsevier
Status:veröffentlicht
Stichwörter:Chinese hamster ovary cells, Fluorometric analysis of deoxyribonucleic acid unwinding, Chemical exposure, Deoxyribonucleic acid strand breaks, Technical Workshop on Genotoxicity Biosensing workshop
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HGF - Programm:Weltraum (alt)
HGF - Programmthema:W FR - Forschung unter Weltraumbedingungen (alt)
DLR - Schwerpunkt:Weltraum
DLR - Forschungsgebiet:W FR - Forschung unter Weltraumbedingungen
DLR - Teilgebiet (Projekt, Vorhaben):W - Vorhaben Strahlenbiologie (alt)
Standort: Köln-Porz
Institute & Einrichtungen:Institut für Luft- und Raumfahrtmedizin > Strahlenbiologie
Hinterlegt von: Kopp, Kerstin
Hinterlegt am:12 Okt 2007
Letzte Änderung:27 Apr 2009 14:25

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